Wat is de beste manier om de chloroplasten van de buffer te scheiden?

2024 Auteur: Fiona Howard | [email protected]. Laatst gewijzigd: 2024-01-10 06:41

Om de pigmenten eruit te kunnen halen, worden de bladgroenkorrels gesuspendeerd in een isolatiebuffer. Om de pigmenten uit de bladgroenkorrels te kunnen halen, moeten we eerst de buffer kwijt. Wat is de beste manier om de chloroplasten van de buffer te scheiden? gebruik een centrifuge om de te scheiden

Hoe isoleer je een chloroplast?

Bij de isolatiemethode van chloroplast wordt de celwand mechanisch gebroken met behulp van een blender of homogenisator. Vervolgens worden het ongebroken bladweefsel en de celresten door filtratie verwijderd. De chloroplasten worden verzameld door centrifugatie met behulp van een percoll-gradiënt.

Hoe maak je een chloroplast-isolatiebuffer?

Bereid de benodigde hoeveelheid 1X Chloroplast Isolatiebuffer door verdun de 2X buffervoorraad 1:1 met dH2O water Voeg 10 µL van de 10% BSA-oplossing toe per ml 1X Chloroplast Isolatiebuffer. Voeg vlak voor gebruik 1 L DTT toe per 1 ml Chloroplast-isolatiebuffer. Label deze buffer als 'Complete Buffer'.

Wat zit er in een chloroplast-isolatiebuffer?

DNA-isolatiebuffer bestond uit 100 mM NaCl, 100 mM Tris-HCl (pH 8,0), 50 mM EDTA en 1 mM DTT De chloroplastlyse werd verkregen door het incuberen van de chloroplastpellet met 8 ml DNA-isolatiebuffer, 1,5 ml 20% SDS, 20 µl 2-mercapto-ethanol en 30 µl proteïnase K (10 mg/ml) in een centrifugebuisje bij 55 °C gedurende 4 uur.

Wat is de pH van de buffer die wordt gebruikt om spinazieblad te homogeniseren in het chloroplast-isolatieprotocol?

Spinazie zit boordevol goede chloroplasten en ze isoleren gemakkelijk. Je moet de bladeren in een koude blender doen met 0,1 M fosfaatbuffer, pH 7,5 en 0,5 M sucrose om te voorkomen dat ze barsten.