Een enkele lage g-kracht centrifugatie stap maakt milde cellysis mogelijk en voorkomt uitgebreid contact van de kernen met de cytoplasmatische omgeving. Deze snelle methode vertoont een hoge reproduceerbaarheid vanwege de relatief weinig celmanipulatie die de onderzoeker nodig heeft.
Wat doet centrifugeren met cellen?
Centrifugatie met verschillende snelheden maakt het mogelijk om deeltjes te scheiden in 'fracties', afhankelijk van hoe gemakkelijk ze bezinken (Box 1). Bij lage centrifugatiesnelheden kunnen bijvoorbeeld grote cellen van kleine cellen worden gescheiden.
Verwijdert centrifugeren dode cellen?
Scheiding van dode en levende cellen door centrifugatie
Een van de eenvoudigste methoden voor het verwijderen van celresten is density-gradient centrifugation. Density-gradient centrifugatie maakt gebruik van een apparaat dat een centrifuge wordt genoemd en dat een heterogeen mengsel met hoge snelheden ronddraait.
Hoe lyseer je cellen?
De techniek omvat bevriezing van een celsuspensie in een droog ijs/ethanolbad of vriezer en vervolgens ontdooien van het materiaal bij kamertemperatuur of 37°C. Deze methode van lysis zorgt ervoor dat cellen opzwellen en uiteindelijk breken als ijskristallen worden gevormd tijdens het invriesproces en vervolgens samentrekken tijdens het ontdooien.
Wat gebeurt er als je cellen te snel centrifugeert?
Te snel draaien kan een "vegen" van cellen op de wand van de buis veroorzaken die je misschien mist wanneer je de cellen opnieuw in suspensie brengt.
