Amfolyten worden gebruikt om een pH-gradiënt te vormen in het capillair, en de te scheiden eiwitten migreren (of worden gefocusseerd) door het amfolytmedium totdat ze op hun pI ongeladen raken waarden.
Waarom worden amfolyten gebruikt in IEF?
In IEF reizen amfolyten volgens hun lading onder invloed van een elektrisch veld, in aanwezigheid van een pH-gradiënt, totdat de netto lading van het molecuul nul is (bijvoorbeeld iso-elektrisch punt, pI). … Zelfs de eenvoudigste amfolyten (bijv. aminozuren) kunnen een pH-gradiënt creëren en fungeren als een iso-elektrische buffer.
Waarom is een iso-elektrisch punt belangrijk?
Het iso-elektrische punt is belangrijk bij eiwitzuivering omdat het de pH vertegenwoordigt waar de oplosbaarheid doorgaans minimaal is. … Dit polymeer heeft unieke eigenschappen om ervoor te zorgen dat eiwitten een pH-gradiënt vormen wanneer je een elektrisch veld over de oplossing aanbrengt.
Hoe creëren amfolyten een pH-gradiënt?
In CIEF wordt een heterogene pH-gradiënt gecreëerd in het capillair door spanning aan te leggen over de drageramfolyten De breedte van de pH-gradiënt hangt af van welke reeks amfolyten is geselecteerd. Amfolyten zijn in de handel verkrijgbaar voor zowel brede als smalle pH-bereiken, zoals weergegeven in figuur 5.2.
Wat is amfolytenchemie?
Amfolyten zijn verbindingen die, wanneer opgelost in water (wat een amfotere verbinding is), als zuur of als base kunnen werken.
