Logo nl.boatexistence.com

Als je dierlijke cellen moet ontdooien?

Inhoudsopgave:

Als je dierlijke cellen moet ontdooien?
Als je dierlijke cellen moet ontdooien?

Video: Als je dierlijke cellen moet ontdooien?

Video: Als je dierlijke cellen moet ontdooien?
Video: Thawing Cells: Cell Culture Basics 2024, Mei
Anonim

Richtlijnen voor het ontdooien van cellen

  1. Bevroren cellen snel ontdooien (< 1 minuut) in een waterbad van 37°C.
  2. Verdun de ontdooide cellen langzaam voordat u ze incubeert, met behulp van voorverwarmd groeimedium.
  3. Plaats ontdooide cellen met hoge dichtheid om herstel te optimaliseren.
  4. Gebruik altijd de juiste aseptische techniek en werk in een afzuigkap met laminaire stroming.

Waarom worden cellen ontdooid?

Het is van vitaal belang om cellen op de juiste manier te ontdooien om de levensvatbaarheid van de kweek te behouden en de kweek in staat te stellen sneller te herstellen. Sommige cryoprotectanten, zoals DMSO, zijn giftig boven 4 °C. Daarom is het essentieel dat culturen snel worden ontdooid en verdund in kweekmedium om de toxische effecten te minimaliseren.

Wat is het ontdooiproces?

Ontdooien is het proces waarbij een bevroren product van bevroren naar een temperatuur (meestal boven 0°C) wordt gebracht waar er geen resterend ijs is, d.w.z. "ontdooien". Ontdooien wordt vaak beschouwd als het omkeren van het invriesproces.

Wat is de beste manier om cellen te bevriezen?

Vries de cellen langzaam in door de temperatuur te verlagen met ongeveer 1°C per minuut met behulp van een gecontroleerde cryo-vriezer of een cryo-bevriezingscontainer zoals Mr. Frosty', verkrijgbaar bij Thermo Scientific Nalgene labware (Nalge Nunc). Gebruik altijd het aanbevolen vriesmedium.

Hoe ontdooi je een primaire cel?

Veeg de buitenkant van de flacon met cellen af met 70% ethanol of isopropanol. Draai in een bioveiligheidskast de dop een kwartslag om de interne druk te ontlasten en draai hem vervolgens weer vast. Ontdooi de cellen snel in een waterbad van 37°C door de injectieflacon voorzichtig rond te draaien. Verwijder de injectieflacon als er een kleine hoeveelheid ijs achterblijft.

Aanbevolen: