Vortexen zal je RNA niet afschuiven om het onbruikbaar te maken als je willekeurige RT-priming uitvoert - alleen als je lang mRNA wilt klonen. De technische ondersteuning van Invitrogen is ook correct. Chloroform is zwaarder dan Trizol en zal naar de bodem van de buis zinken.
Is het veilig om RNA te vortexen?
Vortex Trizol-lysaten of RNA-monsters niet om afschuiving te voorkomen. Bewaar RNA-monsters na extractie altijd op ijs. Dit protocol is bedoeld voor monsters waarin 1 ml Trizol is gelyseerd in een buis van 1,5 of 2 ml.
Kun je RNA verwarmen?
Vermijd daarom hoge temperaturen ( boven +65°C), aangezien deze de integriteit van het RNA aantasten. In plaats daarvan, om secundaire structuren uit te smelten, verwarmt u RNA tot +65°C gedurende 15 minuten in aanwezigheid van denaturerende buffers.
Hoe resuspendeer je RNA-pellets?
resuspendeer je pellet met warm water (40-50 graden celc). incubeer gedurende 10 minuten in 45 deg celc. zet ze in +4 voor 4-6 uur.
Hoe laat je RNA neerslaan?
A.
Nadat de zoutconcentratie is aangepast, kan het RNA worden geprecipiteerd door toevoegen van 2,5 volumes ethanol of 1 volume isopropanol en grondig mengen, gevolgd door koeling gedurende ten minste 15 minuten bij -20° C.
