Bimoleculaire Fluorescentie Complementatie (BiFC)-assay is een methode die wordt gebruikt om eiwit-eiwitinteractie in vivo direct te visualiseren met behulp van live-celbeeldvorming of vaste cellen. … BiFC werd voor het eerst beschreven door Hu et al.
Hoe werkt bimoleculaire fluorescentie-complementatie?
Het werkingsprincipe van BiFC is gebaseerd op de ontwikkeling van een fluorescerend complex, als resultaat van de associatie van twee segmenten van een fluorescerend eiwit wanneer ze dicht bij elkaar zijn vanwege eiwit-eiwit interactie in de fragmenten, d.w.z., in BiFC, is een fluorofoor verdeeld in amino- en carboxylterminale uiteinden.
Wat is de BiFC-test?
bimoleculaire fluorescentie-complementatie (BiFC)-assay maakt eenvoudige en directe visualisatie van eiwitinteracties in levende cellen mogelijk (45). De BiFC-benadering is gebaseerd op de vorming van een fluorescerend complex wanneer twee eiwitten die zijn gefuseerd met niet-fluorescerende fragmenten van een fluorescerend eiwit met elkaar interageren (Fig.
Waarom is de BiFC-test gedaan?
Het idee van BiFC is om de helften van GFP tot expressie te brengen die zijn gefuseerd met uw eiwitten van belang Als de POI's op elkaar inwerken, kunt u beide helften samenbrengen om een functionele GFP te krijgen. Dus als er de helft van een GFP tot expressie wordt gebracht in de cel, verbaast het me niet dat een GFP-antilichaam dit kan detecteren.
Is BiFC omkeerbaar?
De onomkeerbaarheid van BiFC-complexen is goed gedocumenteerd (10), en het lijkt erop dat de meeste, zo niet alle, op fluorescerende eiwitten gebaseerde BiFC-systemen onomkeerbaar zijn (8, 33, 43, 48–51).
