Logo nl.boatexistence.com

Hoe doe je immunofluorescentie?

Inhoudsopgave:

Hoe doe je immunofluorescentie?
Hoe doe je immunofluorescentie?

Video: Hoe doe je immunofluorescentie?

Video: Hoe doe je immunofluorescentie?
Video: Immunofluorescence 2024, Mei
Anonim

Hier volgt een overzicht van de verschillende stappen van een protocol voor indirecte immunofluorescentiekleuring

  1. Experimentplanning en monstervoorbereiding. …
  2. Monsterfixatie. …
  3. Celpermeabilisatie. …
  4. Blokkeren. …
  5. Primaire antilichaamincubatie. …
  6. Secundaire antilichaamincubatie. …
  7. Tegenbeits en montage.

Hoe voer je immunofluorescentie uit?

Alle incubatiestappen vinden plaats bij kamertemperatuur

  1. Was de cellen twee keer en gebruik een pincet om het dekglaasje met omgekeerde cellen voorzichtig in de bevochtigde kamer te plaatsen.
  2. Fixeren met 4% formaldehyde gedurende 10 minuten en 3 × wassen.
  3. Permeabiliseer met 0,1% TX-100/PBS gedurende 15–20 minuten en was 3 ×.

Hoe gebruik je immunofluorescentie in een cel?

Immunofluorescentieprotocol voor hechtende cellen

  1. Seed 1-1,5 x104 cellen per putje van een 4-kamer dia in 500 mL kweekmedium. Incubeer bij 37°C bij 5% CO2.
  2. 32–36 uur na het zaaien van de cellen, verwijder het celkweekmedium en spoel de cellen 3 keer met 500 µL van 1X PBS.

Wat is een voorbeeld van immunofluorescentie?

Een onderzoeker kan bijvoorbeeld primaire antilichamen maken in een geit die verschillende antigenen herkennen, en vervolgens kleurstofgekoppelde secundaire konijnenantilichamen gebruiken die het constante gebied van het geitenantilichaam herkennen (" konijn anti-geit" antilichamen).

Wat is het nut van immunofluorescentiekleuring?

Immunofluorescentie (IF) kleuring is een veelgebruikte techniek in biologisch onderzoek en klinische diagnostiek IF maakt gebruik van fluorescent gelabelde antilichamen om specifieke doelantigenen te detecteren. Gevolgd door beeldvorming, is het een zeer directe techniek omdat je iets echt kunt zien.

Aanbevolen: